Как определяют чувствительность бактерий к антибиотикам

Методы определения чувствительности бактерий к антибиотикам

Как известно, со временем многие бактерии перестают реагировать на применяемые ранее противомикробные препараты.

Эмпирическая терапия антибиотиками, которая учитывает природную чувствительность микроорганизмов, может быть назначена больному сразу, без проведения дополнительных исследований, но она не всегда приводит к выздоровлению.

Именно поэтому специалисты все чаще назначают этиотропную антибиотикотерапию, которая подбирается индивидуально для каждого человеческого организма.

Правила определения чувствительности

Проявляемая микроорганизмами устойчивость к антибактериальной терапии может быть врожденной или приобретенной. При врожденной резистентности бактерия нейтрализует действие препаратов с помощью ферментов либо же имеют непроницаемую по отношению к ним бактериальную мембрану. Обычно микроорганизм обретает устойчивость к ранее эффективным антибиотикам в результате мутаций.

Определение чувствительности к антибиотикам бактерий всегда проходит в несколько этапов:

• Осуществляется забор материала.
• Доставляется в лабораторию.
• Проводится посев на питательные среды.
• Выделяется вид и штамм микроорганизма.
• Изучается восприимчивость к антибиотикам.

Для определения чувствительности патогенных бактерий используют методы диффузии и разведения, провести которые можно различными способами.

Методы диффузии

Для определения чувствительности к антибиотикам таким способом, используют:

1. Диски. Метод относится к качественным и является наиболее используемым. На среду густо высеивают изучаемую культуру. Обычно пользуются рыбным бульоном, агар-агаром, натрий фосфат двузамещенным. Затем сверху располагают бумажные диски в количестве не более 6 штук, соблюдая между ними дистанцию в 2 см. Инкубация в термостате длится в течение суток, при температуре 37 °С. Оценку для данного определения чувствительности микроорганизмов к антибиотикам дают по зоне подавления роста возле дисков. Ее появление говорит о чувствительности микробов к антибиотикам или же об их умеренной резистентности, что зависит от диаметра зоны. Ее отсутствие указывает на устойчивость возбудителей к изучаемым антибактериальным препаратам.
2. Е-тест проводят с помощью специальной полоски. Выполняется тест по аналогии с предыдущим. На полоске имеются разметки, указывающие на минимальное или высокое содержание антибиотика.

Рассмотренные методы определения чувствительности бактерий к антибиотикам имеют как преимущества, так и недостатки. Так, не все антибактериальные препараты можно использовать в исследованиях, поскольку некоторые из них имеют плохо диффундирующую способность. Это касается таких антибиотиков, как полимиксин и ристомицин.

Е-тестом пользуются довольно редко, что связано с высокой стоимостью данного метода. Метод дисков довольно прост и проводится в любой баклаборатории.

Методы разведения

Данным способом определение чувствительности микроорганизмов к антибиотикам проходит с использованием жидкой среды или агара. Методы разведения позволяют установить минимальное содержание антибактериального препарата, при котором он подавляет рост изучаемых патогенных бактерий.

Первоначально изготавливается основной раствор, из которого затем производят все остальные. Затем к ним добавляют 0,1 мл изучаемого возбудителя. В конце оставляют пробирку для контроля.

Исследуемые пробирки подвергают инкубации при температуре 37 °С на протяжении 18–24 часов.

Сохраняющееся помутнение, наоборот, указывает на неспособность антибиотика подавить жизнедеятельность микроорганизма.

Данный способ исследования относится к количественным, так как позволяет рассчитать минимальную концентрацию антибактериального препарата, в которой он угнетает рост бактерий.

С помощью данных методов можно выявить дозировку антибиотика, которая проявит наибольшую эффективность в лечении и не вызовет при этом в дальнейшем у микроорганизмов резистентности.

Определение антибиотика в биологических жидкостях

Еще один из доступных методов выявления чувствительности бактерий к используемым антибактериальным препаратам. Вначале исследования ставят 2 ряда пробирок – с эталонным антибиотиком и с биологической жидкостью (кровью или мочой).

Тест-бактерии, которые изготавливают в среде Гипса с глюкозой, вводят в каждую исследуемую пробирку. Если биологическую жидкость изучают на чувствительность к пенициллину, тетрациклину и эритромицину, то в роли тест-бактерии выступает S.

aureus, а если к стрептомицину – то E.coli.

Подготовленные посевы помещают в термостат и инкубируют при температуре 37 °С на протяжении 18–24 часов. Оценивают результаты этого исследования согласно степени помутнения и окрашивания индикатора.

Чувствительность S.aureus к пенициллину

Бульонную культуру стафилококка в количестве 0,5 мл смешивают в колбе с 20 мл питательного агара (с температурой 45 °С). Полученную смесь перемешивают и перемещают в чашку Петри. Как только агар застывает, в центр чашки кладут диск с пенициллином, по радиусам которого отмечают исследуемые культуры.

Оценивают результаты спустя сутки после инкубации. Если появилась зона роста стафилококка вокруг диска, это свидетельствует о способности возбудителя продуцировать бета-лактамазу, которая, в свою очередь, повышает его невосприимчивость к пенициллину.

Источник: http://elaxsir.ru/lekarstva/antibiotiki/metody-opredeleniya-chuvstvitelnosti-bakterij-k-antibiotikam.html

Чувствительность к антибиотикам: особенности сдачи анализа

Антибиотиками – называют препараты натурального или синтетического происхождения, которые используются для лечения разнообразных болезней. Основные компоненты этих средств оказывают пагубное воздействие на быстрый рост бактерий и клеток.

Однако, несмотря на то, что антибиотические средства помогают вылечить инфекционные, вирусные, бактериальные патологии, все-таки они оказывают негативное воздействие на микрофлору кишечника и снижают иммунную систему. По этой причине, прежде чем начинать принимать это средства обязательно нужно провести анализ на чувствительность к антибиотикам.

Кроме этого эти средства должен назначать только лечащий врач в зависимости от индивидуальных особенностей организма каждого пациента.

Зачем проводят исследование на чувствительность к антибиотикам

Анализ на чувствительность к антибиотикам называется бактериальным посевом.

За счет проведения этих мероприятий врач может точно определить вид возбудителя и его уровень концентрации в организме. Цель состоит в выявлении в полученном материале вредных микроорганизмов.

Это в дальнейшем помогает подобрать необходимое лечение, которое сможет быстро подавить активность патогенных организмов.

После применения антибиотиков микроорганизмы могут проявлять разное состояние. По этой причине их разделяют на несколько разновидностей:

• чувствительного типа;
• условно-устойчивого вида;
• устойчивого вида.

Чувствительными микроорганизмами считаются те, активность которых подавляется установленными дозировками антибиотических медикаментов. Для снижения деятельности условно-устойчивых бактерий необходимо повышать дозировки антибиотика. А вот активность устойчивых организмов не прекращается даже после поступления повышенных дозировок антибиотического средства.

При этом у каждого человека уровень чувствительности микрофлоры к антибиотическим препаратам у каждого индивидуальный. У разных людей микроорганизмы могут реагировать на одни и те же антибиотические средства по-разному.

По этой причине иногда назначение антибиотических средств только лишь на основании состояния больного и среднестатической клинической картины не всегда может обеспечить положительное воздействие.

Поэтому обязательно нужно сдать анализы на чувствительность к антибиотикам.

Преимущества и недостатки

При приеме антибиотиков врачи рекомендуют проведение бакпосева. При этой процедуре проводится исследование организма человека на чувствительность к составляющим компонентов антибиотиков. Этот метод отличается повышенной специфичностью, при котором не наблюдается перекрестных ложных реакций.

Сдается анализ для того, чтобы выявить уровень чувствительности патогенных бактерий к лечебным антибиотическим средствам. Благодаря этому можно будет в дальнейшем подобрать эффективную лечебную терапию.

Но у этой процедуры имеются и недостатки. К наиболее популярным относятся:

1. Длительный процесс получения результата;
2. Имеются повышенные требования к забору материала;
3. Персонал лаборатории, который должен проводить анализ, должен обладать высокой квалификацией.

Показания и материал

Для того чтобы определить степень чувствительности к антибиотикам для начала стоит изучить при каких показаниях нужно сдавать анализы. Часто исследование крови при приеме антибиотиков проводится при инфекционных патологиях. Особенно часто к этому методу прибегают в гинекологии, урологии, хирургии, онкологии, отоларингологии и в других областях медицины

Главным показанием для проведения исследования считаются патологии с воспалительным характером внутренних органов и систем, а также признаки сепсиса.

Для исследования восприимчивости организма к антибиотикам можно сдавать разный материал:

• кровь. Биохимический анализ крови помогает оценить общее состояние организма. Кровь должна быть стерильна, поэтому она берется в лаборатории;
• урина или моча. При исследовании этого материала определяется бактериальная микрофлора половой системы;
• кал. При помощи исследования кала врач может оценить состояние пищеварительной системы;
• сперма, секрет простаты, слизь из уретры. Исследование этого материала помогает определить, какой возбудитель вызвал проблемы в мочеполовой системе у мужчин;
• мокрота. Исследование мокроты помогает вывить возбудителя заболеваний дыхательной системы.

Можно ли принимать препараты перед сдачей анализа крови?

Некоторые пациенты просто не знают — влияют ли антибиотики на анализ крови. Но это исследование обладает несколькими важными правилами, от соблюдения которых зависит ее результат. Если их заранее не изучить, то в полученном результате могут наблюдаться некоторые отклонения от нормы.

Так влияет ли прием антибиотиков на анализ крови? Ведь иногда такое исследование делается прямо после приема, антибиотиков, поэтому его результаты могут быть не точными. Но для того чтобы этого не произошло, нужно точно соблюдать несколько рекомендаций:

1. Желательно перестать принимать антибиотические средства за 10 дней до этой процедуры, иначе анализ крови после антибиотиков будет просто бессмысленным;
2. Обязательно врачу нужно сообщить о приеме других медикаментозных средств;
3. Не рекомендуется проводить исследование крови при приеме любые лекарственных средств. Их нельзя принимать в течение 24 часов до проведения биохимического анализа;
4. Все анализы выполняются на голодный желудок, потому что прием пищи может вызвать повышение таких показателей, как глюкоза, холестерол, билирубин. От пищи нужно отказаться минимум за час до проведения процедуры;
5. Делая анализ на гормоны нужно учитывать время суток, часы. При заборе крови из вены оказывает влияние активность человека, его эмоциональное состояние.

Выполняя анализ крови на стерильность, врач должен учитывать наличие возбудителей, давность инфицирования, а также состояние иммунитета. Также он должен изучить, как влияет прием антибиотиков на анализ, потому что от этого могут измениться результат.

После приёма антибиотиков должно пройти определенное время, а вот, сколько определяет только специалист, но не меньше 10 дней. Если вдруг результаты будут не точными, то может быть проведен повторный анализ, а вот через какое время решает специалист.

Особенности сдачи анализа на чувствительность к антибиотикам

Качество исследования зависит от нескольких факторов, главный из которых является соблюдение правил при заборе материала для проведения исследования. Подготовка материала к обследованию должна быть выполнена правильно.

Обязательно материал нужно помещать в стерильную посуду и брать стерильными инструментами, иначе в нем могут быть обнаружены и другие бактерии.

Доставка в лабораторию должна быть быстрой, потому что может произойти быстрое изменение кислотности материала.

Как сдавать материал на анализ:

• анализ мочи на флору. Забор мочи на флору и чувствительность к антибиотикам выполняется в утренний период. Для этого нужно собрать среднюю порцию урины. Ее объем должен составлять не меньше 10-15 мл. При сдаче мочи на микрофлору посуда должна быть чистой и стерильной. Для проведения обследования мочи на микрофлору необходимо соблюдать все важные рекомендации. Важно доставить материал в лабораторию в течение 2 часов. А вот можно ли сдавать анализ мочи во время приема антибиотиков точно может ответить врач, но делать этого нежелательно. Предварительно специалист должен сделать анализ мочи на стерильность;
• сдача кала. Анализ кала на дисбактериоз помогает определить состояние органов пищеварительной системы и выявить наличие различных возбудителей. Материал нужно помещать в стерильную посуду. Его объем должен составлять 20-30 грамм. Максимальное время его доставки в лабораторию должно составлять 5 часов;
• анализ мокроты на антибиотики необходимо проводить утром. Предварительно нужно очистить рот и зубы. Материал сдайте в лабораторию в течение часа;
• анализ крови на стерильность можно сдавать после приема антибиотиков. Материал берется в лабораторных условиях. Правильно проведенное иследование помогает выявить уровень сопротивляемости организма, а также наличие бактерий. Также кровь берется для того, чтобы провести анализ на иммуноглобулин, при помощи него выявляется наличие заболеваний и патогенных организмов, снижающих иммунитет. Результат можно получить через несколько суток – 2-3;
• анализ спермы. Спермограмму выполняют в лаборатории, там сразу берется материал и обследуется. Анализ спермы позволяет определить наличие различных патологий мужской мочеполовой системы.

Расшифровка

После того как проведено исследование на чувствительность к антибиотикам расшифровка проводится уже через несколько суток. Расшифровка анализа выполняется достаточно просто.

Изучение материала при расшифровке включает несколько степеней:

• первая – во время нее нет роста;
• вторая – происходит рост на среде с твердой структурой до 10 колоний;
• третья – до 100 колоний;
• четвертая – выше 100 колоний.

Эти условия важно соблюдать, потому что именно от них зависит точное выявление наличие условно-патогенной микрофлоры.

Первая и вторая степень не являются показателями наличия в организме наличия инфекции, а только лишь говорят о загрязненности материала. А вот 3 и 4 степень свидетельствуют о расширенной инфекции с воспалительным характером.

Если выявляется патогенная инфекция, то прием антибиотиков можно начинать сразу, но их назначает врач.

При проведении анализа важной составляющей должна быть резистентность бактерий на определенный вид антибиотика.

Для этого обязательно выполняется антибиотикограмма, которая помогает подобрать подходящие названия антибиотических средств для лечения, их совместимость.

Чувствительный микроорганизм к антибиотиком погибает при установленных дозах врачом, если же он обладает повышенной устойчивостью на действие антибиотиков, то врач подбирает более сильные препараты в повышенной дозе

Источник: https://proantibiotik.ru/vzroslym/chuvstvitelnost-k-antibiotikam

Расшифровка чувствительности к антибиотикам: о чем говорит анализ?

Анализы на чувствительность к антибиотикам в медицине называют бактериальным посевом. Эти методы позволяют определить возбудителя заболевания и его концентрацию в организме. Цель анализа – выявить в полученном материале вредные микроорганизмы, чтобы в дальнейшем решить задачи насчет специфического лечения.

Выделив микроорганизмы, проводят антибиотикограмму – определение чувствительности обнаруженных микробов к бактериофагам и антибактериальным препаратам.

Методы лабораторного определения чувствительности бактерий к антибиотикам

Содержание статьи

Метод отличается высокой специфичностью – не наблюдается перекрестных ложных реакций. Есть возможность исследовать любую биологическую жидкость. Проводится он в целях определения чувствительности выявленного микроба к лечебным средствам, что позволяет применять самую эффективную терапию.

Недостатки

Показания для бактериологического посева

Этим методом широко пользуются в медицинской практике, особенно при инфекционных заболеваниях, в гинекологии, хирургии, урологии, онкологии, отоларингологии и пр.

Абсолютным показанием являются любые воспалительные заболевания органов и систем, подозрение на сепсис.

Материал для исследования

Исследовать могут следующие материалы: слизь из зева, носоглотки, цервикального канал, уретры; мокроты; кал; урину; кровь; секрет простаты; грудное молоко; желчь; спинномозговую жидкость; содержимое кист; раневое отделяемое.

В кале могут выделить:

• кишечную группу бактерий – сальмонеллы, шигеллы, иерсинии;
• тифопаратифозную группу;
• условно-патогенных возбудителей кишечных инфекций;
• анаэробных микробов; возбудителей пищевых инфекций;
• обследовать на дисбактериоз кишечника.

В биопунктате, гнойном отделяемом и содержимом ран выделяют:

• псевдомонады;
• синегнойные палочки.

Урогенитальную слизь исследуют так:

• на наличие возбудителей половых инфекций – гонококк, грибы, трихомонады, уреаплазму, листерии, микоплазму;
• на бактериальную флору.

Кровь могут исследовать на стерильность. Грудное молоко, секрет простаты, мочу, мазки, раневое отделяемое, суставная жидкость, желчь – эти материалы могут быть обследованы на обсемененность (бактериальную флору).

Собранный материал помещают в специальные среды. В зависимости от необходимого результата посев делают в разные среды. К примеру, в избирательная или элективная среда, примером которой является свернутая лошадиная сыворотка для обнаружения возбудителя дифтерии или же среда с солями желчных кислот/селенитом для определения возбудителя кишечных инфекций.

Другой вариант – дифференциально-диагностические среды, которые применяют для расшифровки бактериальных культур.

После этого питательную среду помещают в термостат, где создают благоприятные условия для жизнедеятельности возбудителей заболеваний. При этом задают конкретное время, влажность и температуру.

После извлечения образца из термостата проводят контрольный осмотр выросших колоний микробов (культура микроорганизмов). Если есть необходимость, проводится микроскопия полученного материала со специальной окраской. Контрольный осмотр – оценка формы, цвета, плотности колоний.

В заключение проводится подсчет возбудителей. В лабораторной практике используется понятие колониеобразующая единица (КОЕ) – одна микробная клетка, которая способна образовать колонию, или же видимая колония микробов. Показатель КОЕ позволяет определить количество микробов в образце или определить их концентрацию. Подсчет КОЕ может проводиться разными методами.

Качество теста зависит от нескольких факторов, включая соблюдение правил при заборе материала для исследований. Посуда и инструменты должны быть стерильными! В противном случае происходит контаминация (происходит обсеменение бактериями, не имеющих клинического значения), что делает тест бессмысленным.

Если человек принимает антибиотики, посев не будет точным. Прием таковых нужно прекратить за 10 суток до предполагаемой даты анализа. Также нужно сообщить лечащему врачу о приеме любых медикаментозных средств.

Доставка в лабораторию должна быть очень быстрой, не допускается высыхание материала и изменение его кислотности.

К примеру, кал нужно доставлять в теплом виде.

1. Забор мочи проводится после утренних гигиенических процедур. Собирают среднюю порцию урины. Объем мочи – 10-15 мл. посуда должна быть стерильной. В лабораторию ее нужно доставить за 2 часа;
2. Если назначен мазок из носа или зева: нельзя чистить зубы, полоскать рот/нос дезинфекторами, есть и пить;
3. Забор кала проводят утром стерильной лопаткой в такую же посуду. Объем – 15-30 г. Не допускается попадание в него мочи. Максимальное время доставки – 5 часов. Не допускается замораживание. Кал собирают без слабительных и клизм;
4. Кровь берут до антибиотикотерапии. Минимальное количество – 5 мл для детей, не меньше 15 мл взрослым;
5. Проба мокрот берется утром натощак. Предварительно полощут рот и чистят зубы. Доставляют в лабораторию максимум за 1 час;
6. Грудное молоко собирают после водных процедур. Кожу около соска обрабатывают спиртом. Сцеживают 15 мл молока, затем последующие 5 мл выдавливают в стерильный контейнер. Доставляют его за 2 часа;
7. Мазок половых органов: забор осуществляют минимум через 14 с момента окончания менструаций, не раньше месяца после курса антибиотиков. Не мочиться на протяжении 2 часов женщинам и 5-6 часов до пробы мужчинам.

Данный анализ проводят с целью определения аллергии у человека на конкретный медикамент. Это позволяет после выявления бактерий и определения их чувствительности к антибиотику подобрать лечение. Но если у человека имеются какие-либо противопоказания к таким лекарствам, проводится внутрикожная проба, чтобы снизить риск развития побочных реакций.

Результат исследования слизи из носоглотки готов спустя 5-7 суток, испражнения – 4-7, урогенитальный соскоб– 7, посев на общую флору – 4-7, кровь на стерильность – 10.

В исследуемом материале выделяют несколько степеней роста микроорганизмов (обсемененность).

• Первая степень – рост отсутствует;
• вторая степень – рост на твердой среде до 10 колоний;
• третья – до 100;
• четвертая – больше 100 колоний.

Результаты очень важны при выявлении условно-патогенной микрофлоры, так как 1 и 2 степени не считаются причинами заболевания, а просто свидетельствуют о загрязненности исследуемого материала, однако 3 и 4 степень указывают на причину воспаления. При выделении патогенной флоры учитывают абсолютно все колонии.

Результаты подсчета КОЕ/мл расшифровывают следующим методом:

• 103/мл – одна колония;
• 104/мл – от одной до пяти;
• 105/мл – от 5;
• 106/мл – больше 15.

Количество колоний важно для определения степени патологии и контроля проводимой терапии.

Важной составляющей диагностики и лечения является определение чувствительности возбудителя к антибактериальным препаратам. Набор антибиотиков, к которому резистентный или чувствителен возбудитель, называют антибиотикограммой.

Чувствительность микроорганизма – это когда антибиотик подавляет его размножение. Резистентность – это устойчивость бактерии, то есть лекарство никак на нем не отразится.

Антибиотикограмма выдается в конкретных единицах измерения – минимальной ингибитирующей концентрации (МИК).

Как видите, исследованием данного вопроса может заниматься искючительно пофильный специалист. Здоровья вам и хорошего самочувствия!

Источник: https://mjusli.ru/krasota_i_zdorove/jeto_polezno/chuvstvitelnosti-k-antibiotikam

Анализ на чувствительность к антибиотикам: для чего нужен и когда назначается

Антибиотики давно стали обязательным составляющим элементом любой антибактериальной терапии.

К сожалению, ритм жизни у многих людей таков, что они не могут позволить себе длительное отсутствие на рабочем месте.

По этой причине они самостоятельно назначают себе подобные препараты при малейших признаках простуды.

Однако делать этого категорически нельзя, ведь бактерии способны активировать особый механизм защиты от тех или иных лекарственных средств.

Анализ на чувствительность к антибиотикам выполняют с помощью лабораторных методов для выявления возбудителя того или иного заболевания и его количество в организме. Данное исследование позволяет подобрать оптимальную схему приема препарата.

Специалисты используют для этого 2 основных способа:

Важно

МЫ СОВЕТУЕМ! Слабая потенция, вялый член, отсутствие длительной эрекции – не приговор для половой жизни мужчины, но сигнал, что организму нужна помощь и мужская сила ослабевает.

Капсулы «Пантосаган» для потенции помогают не просто получить эрекцию ЗДЕСЬ И СЕЙЧАС, но выступают в качестве профилактики и накопления мужской силы, позволяя мужчине оставаться сексуально активным долгие годы!

Читать подробнее…

1. эмпирический — информацию получают на основании результатов наблюдений или опытов;
2. этиотропный — в этом случае вначале выявляют возбудителя инфекции, а затем определяют степень его чувствительности к тем или иным средствам.

В зависимости от восприимчивости к антибиотикам специалисты разделяют все микроорганизмы на 3 группы:

• чувствительные (S) — для их устранения достаточно стандартной дозы препарата;
• умеренно-устойчивые (I) — им требуется максимальное количество антибиотика;
• устойчивые ® — их невозможно ликвидировать даже повышенной нормой.

При этом у разных людей реакция тех или иных категорий бактерий на антибиотики может отличаться. Поэтому рекомендация о приеме препаратов лишь на основании усредненных статистических данных иногда не приносит желаемых результатов. К тому же необходимо учитывать, что прием данной группы медикаментов уничтожает не только болезнетворные бактерии, но и полезную микрофлору.

Нередки ситуации, когда неверно назначенный препарат ликвидировал нужные бактерии, а вредные микробы оставались невредимы. Для достижения наибольшей эффективности при лечении анализ на чувствительность к антибиотикам необходимо проводить каждый раз при наличии подозрений на бактериальную природу заболеваний.

Врач может назначить проведение подобного исследования по следующим причинам:

• при возникновении необходимости в замене препарата из-за развившихся аллергических реакций;
• для выявления наиболее эффективного медикамента в данном конкретном случае;
• при наступлении фазы привыкания к лекарству;
• из-за малой эффективности выбранного средства.

В настоящее время существует 3 основных способа определения чувствительности бактерий к антибиотику: диско-диффузный, Е-тест и метод серийного разведения. Все они представляют собой микробиологические исследования, поэтому чаще их называют бактериологическим посевом. Простейшим и распространенным является диско-диффузный.

В специальной лабораторной посуде создается благоприятная среда для бактерий, куда их впоследствии и засевают. После этого в чашке Петри размещают пропитанные антибиотиком картонные диски, и бакпосев размещается в термостате на 12-18 часов.

По истечении указанного времени специалист оценивает эффективность каждого вида антибиотика по зоне подавления роста патогенных микроорганизмов. Е-тест проводится таким же способом, как и предыдущее исследование.

Через 12 часов будет ярко выражена зона подавления роста бактерий. Место соприкосновения этого участка и полоски определяют как минимальную подавляющую концентрацию (МПК) — в расшифровке этот показатель означает наименьшее количество препарата, необходимого для уничтожения определенного вида бактерий.

Данный вид анализа на чувствительность к антибиотикам стоит недешево, поэтому используется нечасто. При использовании метода серийного разведения концентрация антибиотика уменьшается. Составы из пробирок вносятся в питательную среду (агар или бульон) и засеваются микроорганизмами.

После посуду помещают в термостат на несколько часов, а затем анализируют полученные результаты. Замутненное содержимое пробирки говорит о наличии патогенной флоры, концентрация антибиотика в ней мала.

Количество препарата в первой емкости без помутнения будет считаться достаточным для лечения.

Мазок на чувствительность к антибиотикам: подготовка к анализу и его проведение

В качестве биоматериала для мазка на чувствительность к антибиотикам используют различные образцы ткани или производные функционирования организма человека. Образец наносится на лабораторное стекло, а затем изучается под микроскопом.

При подозрении на те или иные болезни берется различный материал. Больного с возможной ангиной врач-отоларинголог (ЛОР) направит на сдачу мазка из зева и носа, а гинеколог при постановке на учет по беременности и родам обязательно возьмет слизь из цервикального канала пациентки.

Для получения достоверного результата необходимо правильно подготовиться к анализу. Когда мазок на чувствительность к антибиотикам планируется брать из мочеполовых органов (уретры или микрофлоры влагалища) следует отказаться от интимных контактов за 1-2 дня. Непосредственно перед анализом не следует мочиться 5,5-6 часов мужчинам и не менее 2 часов — дамам.

Если проводился курс лечения антибиотиками, то после его окончания должно пройти минимум 2 недели.

Затем пробирки с анализами устанавливают в термостат, где созданы идеальные условия для жизнедеятельности бактерий. Прибору задают определенные параметры: температуру, влажность и период времени.

По истечении указанного срока образцы извлекают из термостата и приступают к контрольному осмотру выросших колоний.

На основании полученных данных составляют антибиотикограмму, определяющую чувствительность выявленных микроорганизмов к антибактериальным средствам и бактериофагам.

В зависимости от метода исследования врач может получить данные анализов через 2-3 дня после сдачи пациентом биоматериала в лабораторию.

Результаты мазка на чувствительность к антибиотикам считаются действительными только во время течения того заболевания, по поводу которого его назначали.

Причем этот срок не включает время приема антибиотиков — прием лекарственных средств может повлиять на результат исследования.

Анализ крови и мочи на чувствительность к антибиотикам

Нередко для изучения используют и другой биологический материал. В поликлиниках широко распространен анализ крови на чувствительность к антибиотикам. Особая подготовка к нему не требуется, единственное условие — исследование проводится до начала антибиотикотерапии.

У взрослых пациентов берут минимум 15 мл крови, у детей — не менее 5 мл. Алгоритм забора биоматериала прост — взятую при помощи одноразового катетера кровь помещают в стерильную пробирку с резиновой пробкой, в которой создана питательная для возбудителей болезни среда.

Как правило, через 12-18 часов результат анализа крови на чувствительность к антибиотикам уже известен, однако, если микроорганизмы относятся к классу медленнорастущих, то потребуется несколько дней наблюдений. Не менее часто используется анализ мочи на чувствительность к антибиотикам.

Показаниями для него может стать цистит, уретрит, воспаление почек — пиелонефрит. В этом случае понадобится подготовка.

Сбор биоматериала для анализа мочи на чувствительность к антибиотикам проводится после утренних гигиенических процедур без применения антисептических средств.

Хотя в мочевом пузыре моча стерильна, после прохождения через женские половые органы она может получить непатогенных кокков в малой концентрации, но в большинстве случаев остается чистой.

У мужчин в этом отношении все иначе: из передней части уретры в мочу попадает целый спектр микроорганизмов — стафилококки, дифтероиды и некоторые непатогенные бактерии. Небольшие отклонения в расшифровке анализа мочи на чувствительность к антибиотикам входят в категорию нормы. В некоторых случаях (например, при лактационном мастите) на анализ берут грудное молоко.

Проба берется перед кормлением ребенка следующим образом:

• обрабатывают спиртом кожу вокруг соска;
• сцеживается небольшое количество молока — около 15 мл, следующие 5-10 мл жидкости из каждой груди собирается в отдельный контейнер. Биоматериал должен быть доставлен в лабораторию не позднее, чем через 2 часа.

Исследование спермы проводится при подозрении на воспалительный процесс или инфекционное заболевание. Эякулят получают при мастурбации или с помощью вибромассажа полового органа. Кроме этого, возможна стимуляция эякуляторного центра электродами, вводимыми в прямую кишку.

Сперму собирают в предварительно прогретую до температуры тела, чистую и сухую емкость. Перед сбором биоматериала необходимо тщательно вымыть руки и половой орган. От интимных отношений лучше воздержаться за 3-5 дней до взятия проб.

В этот же период не следует употреблять алкоголь и посещать баню.

При проведении анализа крови на чувствительность к антибиотикам, а также мочи, кала, грудного молока и спермы, пробу располагают в специальной среде, благоприятной для жизнедеятельности болезнетворных бактерий.

В процессе размножения они создают колонии — их затем и оценивает специалист.

На основании полученных данных составляют антибиотикограмму — перечень антибактериальных препаратов, к которым чувствительны обнаруженные в организме бактерии. Нельзя однозначно ответить на вопрос о сроках готовности анализа.

Она напрямую зависит от биоматериала. Обычно для проведения исследования достаточно 12-24 часов, но в некоторых случаях может потребоваться неделя и даже две.

Результаты анализа на чувствительность к антибиотикам действительны лишь на период заболевания, при котором он был рекомендован. После проведения антибактериального лечения картина может разительно поменяться.

При возникновении подозрений на инфекционное заболевание ни в коем случае не стоит заниматься самолечением и принимать антибиотики. Это чревато серьезными последствиями.

Принимать подобные решения должен исключительно высококвалифицированный специалист.

Источник: https://impotencija.net/urologija/analiz-na-chuvstvitelnost-k-antibiotikam/

Методы определения чувствительности микробов к антибиотикам – МедВывод.ру

Главная / Рациональная антибиотикотерапия / Методы определения чувствительности микробов к антибиотикам

Для определения чувствительности микробов к антибиотикам существует ряд методов, среди которых наиболее распространены: метод последовательных разведений в жидкой питательной среде или питательном агаре, метод диффузии в агар (метод дисков, насыщенных антибиотиками) и ряд ускоренных методов.

Определение чувствительности микробов к антибиотикам in vitro проводится в условиях, значительно отличающихся от тех, в которых препарат действует в организме.

При использовании метода диффузии в агар на результаты исследований влияют толщина слоя питательной среды, ее влажность, скорость диффузии антибиотиков, скорость роста исследуемых микроорганизмов и др.

Метод диффузий в агар (метод бумажных дисков) наиболее прост и широко используется, однако является лишь качественным. Метод последовательных разведений антибиотика в питательной среде в стандартных условиях опыта является более надежным и точным количественным методом.

Метод серийных разведений

Показанием к определению чувствительности методом серийных разведений является необходимость получения количественных данных (преимущественно при тяжелом течении процессов) для проведения регулируемой антибиотикотерапии (разработка режимов введения).

Существуют две модификации метода — определение чувствительного микробов к антибиотикам на жидкой и на плотной питательных средах.

Метод дает возможность определить минимальную подавляющую рост концентрацию антибиотика (МПК) для выделенного штамма возбудителя.

Он заключается в приготовлении ряда последовательных разведений антибиотиков в питательной среде с внесением во все разведения исследуемой культуры по подавлению роста микроба определенной концентрацией антибиотика в питательной среде судят о степени чувствительности микроорганизма.

«Рациональная антибиотикотерапия»,
С.М.Навашин, И.П.Фомина

Неудачи антибиотикотерапии

Ускоренный метод определения чувствительности к антибиотикам

К ускоренным методам определения чувствительности относится метод, с помощью которого обнаруживается образование инволюционных форм бактерий под действием антибиотика при фазово-контрастной микроскопии.

Инволюционные формы микроорганизмов образуются в присутствии бактериостатических концентраций антибиотика. В отсутствие его при действии суббактериостатических концентраций, а также при устойчивости изучаемого штамма к препарату вырастают нормальные микроколонии.

Морфологические изменения исследуемых культур под действием антибиотика…

В случае чувствительности к действию антибиотика штамма возбудителя не происходит сбраживания глюкозы при культивировании на среде, содержащей глюкозу, феноловый красный (в качестве индикатора) и определенные концентрации антибиотика. При этом среда окрашивается в фиолетовый цвет вследствие ее подщелачивания. Изменение красного цвета среды на желтый свидетельствует о расщеплении глюкозы с образованием кислоты в результате роста штамма, устойчивого…

Метод канавки для определения чувствительности микробов к антибиотикам

В Англии до настоящего времени применяют предложенный Flemming метод канавки.

Для определения чувствительности микробов к антибиотикам этим методом в чашке с агаром вырезают полоску для получения канавки, а затем засевают штрихом перпендикулярно к канавке испытуемые штаммы микробов.

Канавка заполняется растопленным и охлажденным до 35—60°С агаром, содержащим определенные концентрации антибиотика. Благодаря диффузии антибиотика в питательную среду…

Отсутствие зоны задержки роста микроба вокруг диска

Отсутствие зоны задержки роста микроба вокруг диска свидетельствует о том, что испытуемый штамм нечувствителен к данному антибиотику; при зоне диаметром до 10 мм штамм расценивается как малочувствительный. Единичные колонии или тонкая пленка роста внутри зоны задержки роста не учитываются. Размер зон может меняться в зависимости от толщины слоя агара, густоты микробного газона, состава среды. Однако…

Выбор дисков для исследования

Для сокращения объема испытания следует использовать наборы дисков с учетом вида выделенного возбудителя и локализации инфекции (смотрите таблицу ниже).

Для контроля точности и стандартности проведения исследований в каждом опыте необходимо использовать тест-культуры с известной чувствительностью к антибиотикам.

ВОЗ рекомендует для этой цели три культуры Американской коллекции типовых культур: Escherichia coli (АТСС 25922), Staphylococcus aureus (АТСС 25923), Pseudomonas aeruginosa (АТСС 27853).

При определении чувствительности выделенных возбудителей необходимо проводить контрольный анализ с измерением зон задержки роста…

Приготовление чашек при методе диффузии в агар

Приготовление чашек Расплавленную агаризованную среду (бульон на переваре Хоттингера с содержанием 120—140 мг% аминного азота — 1000 мл; агар-агар «тафуинский» —15 г, натрия фосфат двузамещенный — 3 г, рН после стерилизации 7,0—7,2) разливают по 20 мл в стерильные чашки Петри диаметром 100 мм, расположенные на горизонтальной поверхности. Перед заражением поверхность застывшей среды подсушивают в течение…

Способы определения чувствительности микробов к антибиотикам

Из двух способов определения чувствительности микробов к антибиотикам (в жидкой и плотной среде) более точным является метод серий разведений в жидкой среде.

Результаты, полученные при определении чувствительности в твердой питательной среде, менее постоянны.

Метод разведений в агаре не следует применять для оценки чувствительности микробов, дающих тонкий, разреженный рост (стрептококки, пневмококки) или широко распространяющихся по поверхности…

Колебание значения МПК антибиотика в зависимости от величины посевной дозы

Пробирки инкубируют при 37° С в течение 18—24 ч. Результаты учитывают, определяя наличие или отсутствие роста микроба в среде, содержащей различные разведения антибиотика.

Последняя пробирка с задержкой роста (прозрачный бульон)…

Источник: https://www.medvyvod.ru/antibiotikoterapiya/369/

Анализ на чувствительность к антибиотикам: что это значит и как сдавать?

Современная клиническая практика использует два основных принципа, на основании которых производится назначение антибактериальных средств – эмпирический и этиотропный.

1. Эмпирический (данные получены путем наблюдения или опыта) принцип основывается на накопленных знаниях о сущности и чувствительности бактерий, закономерности их роста, а также резистентности (сопротивляемости, выживаемости) микроорганизмов.
2. Этиотропный. При этиотропном принципе первоначально предполагается выявить флору, которая является возбудителем инфекции, а затем определить чувствительность бактерии к определенным антибиотикам.

Определение чувствительности флоры

Бактерии, которые выделяются у больных, подлежат проверке на чувствительность к антибактериальным препаратам.

При этом появляется возможность более рационального проведения терапии антибиотиками. Существуют две основные группы, на которые делятся методы определения чувствительности бактерий к антибиотикам:

• Диффузионные методы;
• Методы разведения.

Также существуют ускоренные методы, позволяющие сократить время на определение чувствительности.

к оглавлению ↑

Диско-диффузионный метод

Диффузионный метод дисков, которые насыщаются антибиотиками, получил широкое распространение из-за простоты. При этом способе определение чувствительности осуществляется следующим образом:

1. Чашка Петри (лабораторный сосуд, имеющий форму плоского цилиндра) частично заполняется питательным веществом – мясопептонным агаром.

   Поверх него наносится (засевается) суспензия бактерий, имеющая определенную плотность.

2. Затем в чашку помещаются картонные диски, пропитанные некоторым количеством антибиотика, которое указывается на этикетке. Антибиотик, проникая в агар, формирует зону вокруг дисков, где рост микроорганизмов подавляется.

3. Чашка Петри помещается в термостат, в котором поддерживается температура 37 °C. Флору инкубируют 18 часов.

   Результат определяется измерением в миллиметрах диаметра той зоны, которая возникла вокруг диска.

При выполнении анализа на чувствительность к антибиотикам немаловажную помощь оказывает Е-тест.

Зона, в которой рост бактерий подавляется, имеет эллипсовидную форму. Место, где происходит соприкосновение этой зоны и полоски, определяется как МПК.

Расшифровка аббревиатуры – минимальная подавляющая концентрации, которая считывается количественно согласно цифрам градуировки.

Диффузионные методы просты и доступны для выполнения практически в любой лаборатории. В связи с тем, что тест по цене довольно дорог, на практике большее распространение получил метод дисков.

к оглавлению ↑

Метод разведения

В основе методов разведения лежит алгоритм двойных последовательных разведений. В этом способе каждая последующая концентрация антибиотика в два раза ниже предыдущей.

Данные разведения вносятся в бульон или агар, являющиеся питательной средой. Поверх засевают флору.

Заметный рост микроорганизмов проявляется в виде помутнения питательной среды. Это свидетельствует о недостаточности концентрации антибиотика. МПК – это наименьшее содержание антибиотика в сосуде, при котором зримо не определяется помутнение, свидетельствующее о жизнедеятельности бактерий.

к оглавлению ↑

Ускоренные методы

Наименьший промежуток времени, через который может быть получен результат исследования на чувствительность бактерий по вышеописанным методам – около 18 часов.

Однако при тяжелом протекании инфекционного заболевания – это длительный период.

В экстренных случаях лечение начинается еще до получения лабораторных результатов.

В связи с этим ускоренные методы имеют явно выраженный практический интерес.

В их основе лежат следующие принципы исследования:

1. Подавление антибиотиком ферментативной (регулируемой как ускорителями, так и замедлителями) активности микробов. При этом тесте индикатор изменяет свой окрас в зависимости от того, в какой степени чувствительна флора, культивированная на глюкозе. При добавлении дрожжевого экстракта к среде время получения результата – около 2,5 часов.
2. Изменение в количественном выражении окислительно-восстановительного потенциала (Eh) при культивировании микроорганизмов в питательной для них среде. При этом тесте добавляемые в среду специальные индикаторы изменяют свой цвет. Метод прост в техническом исполнении. Результаты исследования могут быть получены уже через два часа.
3. Обнаружение методом фазово-контрастной микроскопии образовавшихся инволюционных (находящихся в обратном развитии) форм микроорганизмов. При этом фиксируется концентрация антибиотика, вызвавшая такое изменение.

к оглавлению ↑

Необходимость назначения теста

Воздействие антибактериальных препаратов вызывает приостановку развития микроорганизмов или может привести к их гибели.

Отдельный вид микробов может оказаться чувствителен только к определенным препаратам, которые имеют свой спектр действия. Для их выявления возникает необходимость в назначении теста.

Однако в связи с существенным изменением экологии и производством целого ряда новых антибактериальных препаратов, происходит процесс мутации (преобразования генотипа) бактерий.

Например, синегнойная палочка размножается даже в таком антисептике, как раствор фурацилина. Она является распространенным возбудителем внутрибольничных (нозокомиальных) инфекций и обнаруживается при гнойных ранах, абсцессах, инфекциях мочеполовой системы.

Синегнойная палочка – причина четверти случаев выявления первичных бактериемий (наличие в крови бактерий).

При этом данный организм может формировать чувство кворума благодаря имеющимся сигнальным молекулам, что дает возможность образовать защитную биопленку от вредных для нее веществ.

Синегнойная палочка размножается при повышенной влажности и наличии кислорода.

Является условно-патогенным видом бактерий. Это означает, что данная бактерия постоянно присутствует в организме человека. Ее патологическое размножение происходит при появлении определенных условий. Синегнойная инфекция является опасным заболеванием, которое носит остро выраженную форму. Одну треть инфекций, выявляемых при исследовании анализа мочи вызывает данная палочка.

Уреаплазма передается путем половых контактов или от матери к ребенку при родах. Заражение в быту имеет малую вероятность.

Лечение уреаплазмоза необходимо обязательно, так как вызывающий заболевание организм – внутриклеточный паразит, из-за которого происходит нарушение процесса дробления клетки.

Выявление таких бактерий, как синегнойная палочка и уреаплазма, необходимо для определения окончательного диагноза заболевания.

Посев на чувствительность к антибиотикам выполняется для определения необходимых антибактериальных средств и их доз.

к оглавлению ↑

Выполнение анализа

Из всех существующих методов, с помощью которых выполняется диагностика инфекционных заболеваний, бактериологический посев на флору является наиболее точным.

При этом лабораторном исследовании определяется не только сам возбудитель, но и его количество, а также чувствительность. Метод определяет как патогенную, так и условно-патогенную микрофлору.

Материалом для исследования может являться:

• моча;
• кровь;
• мокрота;
• материнское грудное молоко;
• сперма;
• жидкость из плевры (оболочки легких);
• смыв из бронхов;
• желчь;
• спинномозговая жидкость, специально полученная для диагностики;
• воспалительная жидкость – экссудат;
• мазок.

Мазок – это образец любой ткани или материала, являющегося производным от жизнедеятельности человека, который наносится на предметное стекло для дальнейшего изучения под микроскопом. Срок выполнения может составлять максимально две недели, что зависит от типа определяемого микроорганизма.

Мазок при исследовании урогенитального тракта женщины позволяет выявить воспаления слизистых уретры, влагалища или цервикального канала.

При этом появляется возможность диагностики следующих заболеваний:

• молочница (кандидоз);
• гонорея;
• трихомониаз;
• вагиноз бактериальный.

Мазок также может быть взят из: носоглотки, зева (отверстия, проходящего в глотку изо рта), или конъюнктивы.

Такой анализ, как мазок из зева выполняется для определения доминирующих бактерий в данной области. Среди болезнетворных организмов, населяющих зев, можно выявить золотистые стафилококки, провоцирующие появление чирей на коже. При возникновении ангины, сопровождающейся осложнениями на внутренние органы, может проявиться наличие стрептококков. Это значит, что опять необходим мазок из зева.

При заборе анализа стерильной ватной палочкой пациенту требуется широко открыть рот и откинуть назад голову. Мазок из зева – это безболезненная процедура, требующая, однако выполнения предварительных рекомендаций.

В день забора анализа из зева чистка зубов не рекомендуется.

к оглавлению ↑

Анализ мочи

Исследование мочи позволяет выявить бактерии, такие, например, как синегнойная палочка, являющиеся причиной воспалительного процесса мочевыводящих путей, а также определить их концентрацию.

Выявление патогенных бактерий считается положительным результатом. Количество бактерий в биоматериале подсчитывается в КОЕ – колониеобразующих единицах.

Оно выражается, к примеру, таким числом – десять в шестой степени.

При положительном результате исследования подбирается эффективный антибиотик. При этом следует помнить, что перед введением препарата пациенту требуется предварительная проба на чувствительность к антибиотикам. Определение чувствительности бактерий к антибактериальному препарату выполняется диско-диффузионным методом.

Сдавать анализ мочи не рекомендуется при прохождении антибактериальной терапии. Это является возможным только по истечении двух недель после окончания курса лечения. Собранный анализ нельзя хранить дома, так как в тепле происходит размножение появившихся бактерий, например синегнойной палочки, уже через несколько часов.

Источник: http://OAntibiotikah.ru/diagnostika/analiz-na-chuvstvitelnost-k-antibiotikam.html